干細(xì)胞療法對11例乙型肝炎肝硬化患者療效評估

肝硬化是臨床常見的慢性進(jìn)行性肝病，引起肝硬化的病因有很多，歐美國家以酒精性肝硬化為主，而我國是以乙型肝炎引發(fā)的肝硬化為主，肝硬化患者的HBsAg陽性率高達(dá)76.7％，其形成機(jī)制主要是由于肝炎病毒感染導(dǎo)致廣泛性肝細(xì)胞變性壞死、肝小葉結(jié)構(gòu)破壞、肝臟彌漫性纖維化、結(jié)節(jié)性再生同時(shí)伴有假小葉形成，肝臟逐漸變形、變硬而發(fā)展為肝硬化。

傳統(tǒng)療法常選用保肝、降酶、退黃等基礎(chǔ)治療，而終末期肝硬化臨床治療效果差，缺乏廣泛可行的治療手段。干細(xì)胞療法的出現(xiàn)，以其獨(dú)特的生物學(xué)特性，為肝病治療帶來新的治療思路。

背景：為了提高肝硬化療效，本研究采用了人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞聯(lián)合人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療肝硬化，筆者前期臨床研究發(fā)現(xiàn)，人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞具有極其良好的提高患者免疫的功效，因此先行輸注人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞，改善患者整體狀況，提高其免疫功能。

而后輸入人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，使其歸巢到肝臟，分化為肝細(xì)胞或進(jìn)入肝臟后修復(fù)受損的肝細(xì)胞，并可通過某些細(xì)胞因子的改變，來調(diào)節(jié)免疫、減輕炎癥反應(yīng)、抗肝細(xì)胞凋亡、促進(jìn)血管增生、抗肝纖維化等修復(fù)損傷肝組織，同時(shí)促進(jìn)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的多向分化。兩種細(xì)胞聯(lián)合治療，以更好的發(fā)揮其療效。

目的：探討人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞（hUCB-MNCs）聯(lián)合人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（hUC-MSCs）對乙型肝炎相關(guān)失代償期肝硬化患者的肝功能、炎癥程度及免疫功能的影響。

方法：選取2017年11月—2020年6月研究人員選取11例肝硬化患者，所納入患者第1周輸注1次hUCB-MNCs（ ＞18×10^9/次），第2、3、4周每周輸注1次hUC-MSCs，每次輸注1×10^6／kg，在治療結(jié)束的第４、8、12周進(jìn)行復(fù)查，對比治療前后肝功能、血氨、凝血因子、血清細(xì)胞因子及淋巴細(xì)胞亞群的變化，同時(shí)觀察記錄神經(jīng)、精神癥狀的改變。

人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞聯(lián)合人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞輸注后各項(xiàng)指標(biāo)評估

肝功能、血氨及其他狀況的影響：對PT和PTA影響最快，細(xì)胞輸注結(jié)束后第４周即可顯著改善（Ｐ值均＜0.05），而患者的肝功能酶學(xué)指標(biāo)在細(xì)胞輸注后第８周逐漸恢復(fù)到正常水平（Ｐ值均＜0.05），在輸注結(jié)束第12周時(shí)，肝功能指標(biāo)較之前明顯好轉(zhuǎn)（Ｐ值均＜0.01）（表２）。

細(xì)胞輸注４周后，患者血清中血氨濃度明顯降低（Ｐ＜0.05），隨著時(shí)間的延長，血氨水平持續(xù)下降，除患者No.7、10、11外，其他患者在人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞和人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞輸注12周后均降低到正常水平（Ｐ值均＜0.05）（表３）

細(xì)胞輸注后第４、８周，５例肝硬化腹水患者的腹水均有所減少，除卻N0.10患者仍有少量腹水，且Child-Pugh分級仍然處于Ｃ級。10例患者的乏力、食欲、睡眠、精神、腹脹、下肢水腫等明顯改善，血清膽紅素及PT基本恢復(fù)正常，血清Ａlb也明顯升高，Child-Pugh評分隨之降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ值均＜0.05）（表４）。

血清細(xì)胞因子和淋巴細(xì)胞亞群的影響：采集患者靜脈血，ELISA定量檢測hUCB-MNCs和hUC-MSCs輸注前后血清炎性和抗炎細(xì)胞因子的含量，結(jié)果顯示輸注４周后患者血清炎性細(xì)胞因子lL-6、TNFα水平均明顯降低（Ｐ值均＜0.01），從８到12周，其血清中含量持續(xù)維持在正常水平；患者血清抗炎細(xì)胞因子IL-10、TGFβ在治療后４周顯著上升（Ｐ值均＜0.01），４周后基本恢復(fù)到正常值，到治療后的12周，其表達(dá)水平一直維持在正常值（表５）。

討論：人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞聯(lián)合人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞輸注治療可通過影響機(jī)體的免疫狀況來調(diào)節(jié)免疫性疾病的轉(zhuǎn)歸，可能產(chǎn)生的副作用目前還在隨訪觀察中。截至目前，11例入組治療患者均未發(fā)現(xiàn)明顯的不良反應(yīng)。這些研究結(jié)果為人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞聯(lián)合人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞可以優(yōu)化肝功能且抑制病情發(fā)展提供了有力的依據(jù)。

總結(jié)：人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞聯(lián)合人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞輸注可以分化為肝細(xì)胞或進(jìn)入肝臟后修復(fù)受損的肝細(xì)胞，抑制炎性因子釋放，上調(diào)Treg水平，從而調(diào)節(jié)肝硬化患者免疫功能，改善患者一般狀態(tài)。針對檢測指標(biāo)的改變，對其治療肝硬化的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制進(jìn)行評價(jià)，為終末期肝病的治療探索新方法。